• 1. 山西医科大学附属白求恩医院骨科(太原 030032);
  • 2. 山西医科大学公共卫生学院(太原  030000);
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目的 探讨甘草甜素(glycyrrhizin,GL)抑制高迁移率族蛋白 B1(high mobility group box 1,HMGB1)对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后胶质瘢痕形成的作用及潜在机制。方法 将 72 只雌性 SD 大鼠随机分为假手术组(n=12)、SCI 模型组(SCI 组,n=36)、GL 干预组(SCI+GL 组,n=12)及 NF-κB 抑制剂 1-吡咯烷二硫代羧酸铵盐(pynolidine dithiocarbamate,PDTC)干预组(SCI+PDTC 组,n=12)。SCI 组、SCI+GL 组及 SCI+PDTC 组应用改良 Allen’ s 法制备大鼠 SCI 模型,假手术组仅手术暴露脊髓。首先,对术后 1、2、3 周 SCI 组行 BBB 评分和斜坡实验,Western blot 检测胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)及 HMGB1 蛋白表达,并与假手术组进行比较,以选择胶质瘢痕形成最显著时间点脊髓组织进行后续实验。然后,通过行为学观测(后肢 BBB 评分及斜坡实验),组织学观察脊髓组织结构,Western blot 检测 HMGB1、GFAP、NF-κB 蛋白表达,以及免疫组织化学染色观测 GFAP、硫酸软骨素蛋白聚糖(chondroitin sulfate proteoglycan,CSPG)蛋白表达,探讨 GL 对大鼠 SCI 后胶质瘢痕形成的作用及机制。结果 术后 SCI 组大鼠后肢 BBB 评分及斜坡角度随时间延长而逐渐增大,但各时间点均明显低于假手术组(P<0.05);Western blot 检测显示 SCI 组术后 1、2、3 周 HMGB1 及 GFAP 蛋白相对表达量均明显高于假手术组(P<0.05);其中 SCI 组 3 周变化最明显,选择该时间点脊髓组织进行后续实验。术后 3 周,与 SCI 组相比,SCI+GL 组大鼠 BBB 评分及斜坡角度均明显增大(P<0.05);Western blot 检测 HMGB1、GFAP、NF-κB 蛋白相对表达量以及免疫组织化学染色检测 GFAP、CSPG 蛋白表达均明显下调(P<0.05);HE 染色显示脊髓组织结构紊乱改善、炎症细胞浸润及胶质瘢痕形成均减少。术后 3 周,SCI+PDTC 组 NF-κB、GFAP、CSPG 蛋白表达与 SCI 组相比均明显减少(P<0.05);与 SCI+GL 组相比 NF-κB 蛋白表达下调更显著,GFAP、CSPG 蛋白表达升高(P<0.05)。结论 SCI 后应用 GL 抑制 HMGB1 的表达,可以降低损伤脊髓中 GFAP 以及 CSPG 的表达,从而减少胶质瘢痕的形成,促进大鼠后肢运动功能的恢复。GL 可能通过 HMGB1/NF-κB 途径发挥胶质瘢痕抑制作用。