• 1. 广西医科大学第五附属医院创面修复科(南宁 530022);
  • 2. 广西医科大学第五附属医院整形美容外科(南宁 530022);
  • 3. 广西医科大学第五附属医院放疗科(南宁 530022);
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目的 通过使用腺病毒构建基质细胞衍生因子 1α(stromal cell-derived factor 1α,SDF-1α)过表达的大鼠脂肪干细胞(rat adipose derived stem cells,rADSCs),研究 SDF-1α 修饰促进 rADSCs 迁移能力的效果。方法 取 6 周龄 SPF 级 SD 大鼠脂肪组织分离培养 rADSCs,行细胞形态观察、多向分化(成骨、成脂、成软骨)及流式细胞仪鉴定。取第 3 代 rADSCs,采用 Transwell 细胞迁移实验观察和筛选出优化 rADSCs 迁移能力的外源性 SDF-1α 最佳刺激浓度;通过观察转染后细胞状态和荧光表达情况筛选出 rADSCs 的最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI)。然后取第 3 代 rADSCs 分为 4 组,A 组为单纯 rADSCs;B 组于 rADSCs 中加入最佳浓度 SDF-1α 共培养;C 组为携带绿色荧光蛋白的腺病毒载体(recombinant adenovirus-mediated green fluorescent protein,Adv-GFP)以最佳 MOI 感染 rADSCs;D 组采用 Adv-GFP-SDF-1α 过表达腺病毒以最佳 MOI 感染 rADSCs。通过细胞计数试剂盒 8(cell counting kit 8,CCK-8)法、Transwell 细胞迁移实验检测内外源性 SDF-1α 优化 rADSCs 增殖和迁移的能力。结果 经细胞形态观察、多向分化检测以及流式细胞仪检测显示所培养细胞为 rADSCs。经筛选,优化 rADSCs 迁移能力的外源性 SDF-1α 最佳刺激浓度为 12.5 nmol/L;Adv-GFP 腺病毒最佳 MOI 为 200,Adv-GFP-SDF-1α 过表达腺病毒最佳 MOI 为 400。CCK-8 法和 Transwell 细胞迁移实验检测示,与 A、C 组比较,B、D 组均可显著提高 rADSCs 的增殖、迁移能力(P<0.05);D 组提高 rADSCs 迁移能力的作用弱于 B 组,但促进 rADSCs 增殖能力的作用强于 D 组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 SDF-1α 修饰 rADSCs 可明显促进其增殖、趋化性迁移能力,可优化 ADSCs 在组织再生、创伤修复治疗中的疗效。