• 中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院整形十六科(北京 100144);
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目的 通过观察损伤周围神经早期生长情况,探讨骨骼肌来源细胞(muscle-derived cells,MDCs)修复小鼠坐骨神经缺损的作用机制。方法 收集携带增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)小鼠的后肢骨骼肌,提取 EGFP-MDCs 并培养至 P1 代备用。构建 C57BL/6 小鼠右侧坐骨神经 5 mm 长缺损模型,并用 7 mm 长的聚氨酯(polyurethane,PUR)导管桥接两神经断端,将 EGFP-MDCs 注入 PUR 导管内(MDC 组),与空白组(PUR 组)比较。于术后 1、2 周取术侧坐骨神经近侧断端及远侧断端神经组织,大体观察神经早期生长情况;对神经组织的纵行冰冻切片行雪旺细胞标志物 S100β 免疫荧光染色,计算小鼠再生神经内雪旺细胞迁移的最远距离总和,并观察表达 S100β 的雪旺细胞来源;对神经组织横行冰冻切片行磷酸化酪氨酸激酶受体(phosphorylated erb-b2 receptor tyrosine kinase 2,p-ErbB2)及磷酸化黏着斑激酶(phosphorylated focal adhesion kinase,p-FAK)免疫荧光染色,计算二者蛋白阳性率。结果 大体观察示术后 1、2 周 PUR 组术侧神经的近侧和远侧断端均未相连,而 MDC 组术后 2 周两侧神经断端已连接。免疫荧光染色示,术后 1 周,MDC 组及 PUR 组术侧神经的近侧和远侧断端内表达 S100β 的雪旺细胞并未相连;术后 2 周,MDC 组两侧神经断端内表达 S100β 的雪旺细胞已连接,而 PUR 组仍未连接。术后 2 周,两组再生神经内雪旺细胞迁移的最远距离总和分别较各组术后 1 周显著增加,术后 1、2 周 MDC 组显著高于 PUR 组,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后 1 周,MDC 组近侧断端 p-ErbB2 及 p-FAK 蛋白阳性率均显著高于 PUR 组(P<0.05);术后 2 周两组近侧断端 p-ErbB2 蛋白阳性率差异无统计学意义(t=0.327,P=0.747),MDC 组 p-FAK 蛋白阳性率显著高于 PUR 组(t=4.470,P=0.000)。术后 1、2 周,MDC 组远侧断端 p-ErbB2 及 p-FAK 蛋白阳性率均显著高于 PUR 组(P<0.05)。术后 1、2 周,MDC 组再生神经内均可见部分表达 S100β 的雪旺细胞来源于 EGFP-MDCs。结论 MDCs 可促进小鼠坐骨神经断端内 ErbB2 及 FAK 蛋白磷酸化,促进雪旺细胞迁移。MDCs 可分化为表达雪旺细胞标志物 S100β 的细胞,或作为其他细胞成分参与周围神经损伤的早期修复。

引用本文: 陈子翔, 陆海滨, 杨晓楠, 祁佐良. 骨骼肌来源细胞移植早期修复小鼠周围神经缺损的实验研究. 中国修复重建外科杂志, 2021, 35(8): 1043-1050. doi: 10.7507/1002-1892.202104019 复制

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