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找到 作者 包含"金瑛" 3条结果
  • 关节镜下自体腓骨长肌腱重建膝关节后交叉韧带

    目的探讨关节镜下自体腓骨长肌腱重建膝关节后交叉韧带(posterior cruciate ligament,PCL)的疗效。方法2016 年 1 月—2018 年 12 月,收治 46 例膝关节 PCL 损伤患者。男 34 例,女 12 例;年龄 20~58 岁,平均 40.7 岁。急性损伤 43 例,陈旧性损伤 3 例。术前前抽屉试验阳性 4 例、后抽屉试验及胫骨后沉征阳性 46 例,内翻应力试验阳性 10 例、外翻应力试验阳性 6 例;屈膝 30° 位拨号试验患健侧差值为(5.20±3.91)°;后向应力位胫骨后移距离(12.03±2.38)mm。膝关节 Lysholm 评分为(36.68±7.89)分,国际膝关节文献委员会(IKDC)评分为(33.58±5.97)分,踝关节美国矫形足踝协会(AOFAS)评分为(97.60±1.85)分。关节镜下采用自体腓骨长肌腱解剖重建 PCL,合并的半月板损伤、后外侧复合体损伤及前交叉韧带损伤均根据损伤程度进行对应处理。结果术后切口均Ⅰ期愈合。40 例患者获随访,随访时间 12~26 个月,平均 16.0 个月。末次随访时,膝关节 Lysholm 评分为(84.85±7.03)分、IKDC 评分为(87.13±6.27)分,与术前比较差异均有统计学意义(t=−13.45,P=0.00;t=−39.12,P=0.00);踝关节 AOFAS 评分为(93.98±2.14)分,与术前比较差异无统计学意义(t=8.09,P=0.90)。后向应力位胫骨后移距离为(2.75±1.76)mm、屈膝 30° 位拨号试验患健侧差值为(1.75±2.09)°,与术前比较差异均有统计学意义(t=29.00,P=0.00;t=4.96,P=0.00)。后抽屉试验及胫骨后沉征阳性 1 例,阴性 39 例;前抽屉试验以及内、外翻应力试验均为阴性。结论关节镜下自体腓骨长肌腱重建 PCL 能显著改善膝关节稳定性和功能,临床疗效满意。

    发表时间:2021-01-29 04:30 导出 下载 收藏 扫码
  • 体外诱导人羊膜间充质干细胞向韧带细胞分化的实验研究

    目的探讨人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)是否具有MSCs的特性及经诱导后在体外能否向韧带细胞分化。 方法取产妇胎盘通过酶消化法获得hAMSCs,流式细胞术鉴定hAMSCs表型特征。取第3代hAMSCs分别加入含不同诱导液的L-DMEM/F12培养基:A组TGF-β1+bFGF,B组透明质酸(hyaluronic acid,HA),C组TGF-β1+bFGF+HA,D组为空白对照组。倒置相差显微镜观察诱导后21 d各组细胞形态学变化;磺酰罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)比色法检测各组细胞生长活性;诱导后7、14、21 d分别采用免疫组织化学染色及实时荧光定量PCR检测韧带特异性蛋白和基因Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、肌腱蛋白C(tenascin C,TNC)表达。 结果流式细胞术鉴定结果表明hAMSCs表达MSCs表型。倒置相差显微镜观察示诱导21 d A、B、C组细胞均呈长梭形纤维细胞样生长,C组细胞形态更单一、有明显方向性且较A组排列更紧凑。SRB比色法检测示各组细胞于培养6 d左右达增殖高峰,6 d时A、B、C组细胞活性均显著高于D组。免疫组织化学结果示:诱导培养7 d,各组均未检测到TNC表达;7、14、21 d A、B、C组Ⅰ型胶原表达均显著高于D组,14、21 d A、B、C组Ⅲ型胶原表达显著高于D组,差异均有统计学意义(P<0.001)。B组Ⅰ型胶原表达以及A、C组Ⅲ型胶原、TNC表达随时间增加均呈逐渐增高趋势,各时间点间比较差异均有统计学意义(P<0.001)。实时荧光定量PCR结果示:诱导培养21 d,C组Ⅰ型胶原、TNC mRNA相对表达量显著高于A、B组,B组Ⅲ型胶原mRNA相对表达量显著高于A、C组,差异均有统计学意义(P<0.05)。A、C组Ⅰ型胶原、TNC以及C组Ⅲ型胶原mRNA相对表达量随时间增加呈逐渐上调趋势,各时间点间比较差异均有统计学意义(P<0.001)。 结论hAMSCs具有MSCs的特性,有良好增殖能力,经体外诱导后韧带特异性基因表达上调,韧带特异性蛋白合成增加,可作为韧带组织工程种子细胞来源之一。

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  • TGF-β1 联合 VEGF 对人羊膜间充质干细胞向韧带成纤维细胞体外分化作用的研究

    目的 探讨人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)是否具有 MSCs 特性,以及经 TGF-β1 和 VEGF 联合诱导后是否具有向韧带成纤维细胞分化的能力。 方法 取自愿捐赠的足月产妇胎盘,采用胰蛋白酶胶原酶联合消化法分离培养 hAMSCs,流式细胞术检测 hAMSCs 表型分子,免疫荧光染色检测 hAMSCs 其角蛋白-19(cytokeratin-19,CK-19)和波形蛋白表达情况。取第 3 代 hAMSCs,分别使用含 TGF-β1 和 VEGF 的 L-DMEM/F12 成韧带或纤维细胞诱导培养基(实验组)和普通 L-DMEM/F12 培养基(对照组)培养,细胞增殖-毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测两组细胞增殖能力;培养 5、10、15 d 分别采用免疫荧光染色及实时荧光定量 PCR 检测韧带及血管生成相关特异性蛋白和基因表达。 结果 倒置相差显微镜观察示 hAMSCs 呈单层贴壁生长;流式细胞术结果示 hAMSCs 表达 MSCs 表型分子;免疫荧光染色示 hAMSCs 高表达波形蛋白、低表达 CK-19;hAMSCs 具有向成骨、成软骨及成脂细胞分化的能力。CCK-8 法检测示,7 d 时两组细胞均达增殖高峰,实验组细胞增殖能力于 7 d 后显著高于对照组(P<0.05)。免疫荧光染色示,培养 5、10、15 d 时实验组 Ⅰ 型胶原、Ⅲ 型胶原、纤维连接蛋白(Fibronectin)、细胞连接素(Tenascin-C)表达染色均较对照组增强。实时荧光定量 PCR 结果示,随时间延长实验组 Ⅰ 型胶原、Ⅲ 型胶原、Fibronectin、α-肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、VEGF mRNA 相对表达量均逐渐上调(P<0.05)。除培养 5 d 两组 Ⅰ 型胶原、Ⅲ 型胶原、VEGF mRNA 相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)外,其余各时间点实验组 Ⅰ 型胶原、Ⅲ 型胶原、Fibronectin、α-SMA 和 VEGF mRNA 相对表达量均显著高于对照组(P<0.05)。 结论 hAMSCs 具有 MSCs 特征,且体外增殖能力良好,可作为组织工程种子细胞来源;体外诱导后韧带成纤维细胞及血管生成相关特异性基因表达上调,韧带成纤维细胞特异性蛋白分泌增加,TGF-β1 联合 VEGF 可作为构建组织工程韧带的生长因子选择。

    发表时间:2017-05-05 03:16 导出 下载 收藏 扫码
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